
細胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細胞電穿孔(electroporation),是把外源大分子物質(zhì)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)以及一些小分子等導(dǎo)入細胞膜內(nèi)部的重要方法。
在瞬間強大電場的作用下,溶液中細胞的細胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進入細胞膜。由于細胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細胞外部電流場產(chǎn)生的細胞兩極電壓都被細胞膜承受,細胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計,細胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細胞毒性很小。電場使DNA等物質(zhì)進入細胞膜后只能停止在細胞膜附近,隨后細胞本身的機制可以允許這些物質(zhì)到細胞核等處。
普通電轉(zhuǎn)能量過高可導(dǎo)致部分細胞因膜破壞而死亡,其中能存活下來的細胞內(nèi)部都不會受到電流影響,因為細胞膜完整是細胞存活的必要條件。
由千電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細胞表面的分子特性對電轉(zhuǎn)影響比較小。相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細胞種類上,而且容易定量控制。
以及相關(guān)的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學(xué)特性、電擊管內(nèi)的電場均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細胞保護作用,是獲得高效、低毒性細胞電轉(zhuǎn)的解決方案。
celetrix電轉(zhuǎn)儀應(yīng)用:
?有效的細胞:幾乎所有的真核細胞,包括所有細胞系,原代細胞,干細胞,血液和免疫類細胞,神經(jīng)細胞,植物細胞和胚胎。
?可以電轉(zhuǎn)的物質(zhì)包括DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等。
?適用實驗:瞬時或穩(wěn)定表達蛋白質(zhì)、基因敲除與敲入、siRNA和其他分子機制研究。
?科研領(lǐng)域:細胞分子生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、神經(jīng)學(xué)、癌癥研究、新藥開發(fā)等。
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