NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BC8843
產(chǎn)品名稱：Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
產(chǎn)品規(guī)格：100T/48S
Na+k+—ATP酶活性檢測(cè)試劑盒抗逆
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
中文名稱：Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
別名：Na+k+――ATP酶試劑盒Na+k+――ATP酶測(cè)試盒
規(guī)格：100T/48S
檢測(cè)方法：微量法Spectrophotometer/Microplate Reader
儲(chǔ)存條件：Store at-20℃，6 months
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準(zhǔn)
NobleRyder BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit
Na+K+-ATP酶廣泛分布于植物、動(dòng)物、微生物和細(xì)胞中，可催化ATP水解生成ADP和無機(jī)磷。
Na+K+-ATP酶分解ATP生成ADP及無機(jī)磷，通過測(cè)定無機(jī)磷的量來確定ATP酶活性。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋/恒溫培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽/勻漿器、冰和蒸餾水。
操作步驟：
一、*處理(可適當(dāng)調(diào)整待測(cè)*量，具體比例可以參考文獻(xiàn))
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織*的制備：
細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清;按照每500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入1mL試劑一，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率200w，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次)：8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
組織：稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿。8000g4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
2、血清(漿)*：直接檢測(cè)。
二、測(cè)定步驟
1、可見分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至660nm，可見分光光度計(jì)需用蒸餾水調(diào)零。
三、Na+K+-ATP酶活計(jì)算
1、血清(漿)Na*K*-ATPase活力的計(jì)算：
larbio
定義：規(guī)定每小時(shí)每毫升血清(漿)中Na+K+-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mL)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV總+V樣+TxF
=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xF
2、組織、細(xì)菌或細(xì)胞中Na*K*-ATPase活力的計(jì)算：
(1)按蛋白濃度計(jì)算：
定義：規(guī)定每小時(shí)每毫克組織蛋白中Na+K+-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/mg prot)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV總÷(CprxV樣)÷TxF
=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)+CprxF
(2)按*質(zhì)量計(jì)算：
定義：規(guī)定每小時(shí)每克組織中Na+K+-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/g質(zhì)量)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV總+(V樣+V樣總xW)÷TxF
-7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)÷WxF
(3)按細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量計(jì)算：
定義：規(guī)定每小時(shí)每1萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞中Na+K+-ATP酶分解ATP產(chǎn)生lμmoL無機(jī)磷的量為一個(gè)酶活力單位。
Na+K+-ATP酶活力(U/104cell)=C標(biāo)x(A測(cè)定-A對(duì)照)÷(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xV總÷(V樣÷V樣總xN)÷TxF
=7.5x(A測(cè)定-A對(duì)照)+(A標(biāo)準(zhǔn)-A空白)xF
C標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，0.5μmol/mL：V總：酶促反應(yīng)總體積，0.25mL;V樣：加入*體積，0.1mL：V樣總：加入試劑一體積，1mL;T：反應(yīng)時(shí)間，1/6小時(shí)：Cpr：*蛋白質(zhì)濃度，mg/mL：W：*質(zhì)量，g;N：細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，以萬計(jì)：F：*稀釋倍數(shù)。
注意事項(xiàng)：
1、由于每一個(gè)樣都必須做對(duì)照，本試劑盒100管保證測(cè)48份Na*K*-ATP酶。
2、此法具有微量、靈敏、快速的特點(diǎn)。所以對(duì)測(cè)定所用試管要求嚴(yán)格無磷。
Na+k+—ATP酶活性檢測(cè)試劑盒抗逆
產(chǎn)品訂購信息：
BC8843 Na+k+——ATP酶活性檢測(cè)試劑盒Na+K+——ATPase Activity Assay Kit 100T/48S
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